Problema bioquimica

11 años 2 meses antes #22941 por ingenieroquimico20
hola soy estudiante de ingenieria quimica, solo me queda Bioquimica para acabar la carrera y no consigo aprobarla, os mando un ejercicio de examen para que me ayudeis a resolverlo que no consigo sacarlo. Muchisimas gracias.

Se depositaron 0.5 mL de amberlita en tampón fosfatocitrato 40 mM, pH 4.5, en 6 tubos eppendorf y se añadió a cada uno 0,5 mL de ONPG 4 mM. Se mezcló inmediatamente y se puso en marcha el cronómetro. Se tomó una muestra de 0.4 mL a los tiempos 3 s, 5 s, 10 s,15 s, 30 s, y se depositó en un tubo de ensayo. Posteriormente se añadió 1.5 mL de tampón borato y se midió la absorbancia a 410 nm. Como blanco a tiempo cero, se utilizó un tubo con 0,5 mL de amberlita con la enzima desactivada mediante calor. Los resultados fueron los siguientes:

t (s): 3 5 10 15 30
Abs muestras :0,2 0,378 0,403 0,759 1,338
Abs Blanco: 0,198

Sabiendo que se han inmovilizado 2,8 mg ß-Galactosidasa/mL de amberlita y que ε(ONP, 410 nm)= 4600 M-1cm-1, calcular las constantes cinéticas Km (mM) y Vmax (U/mg) de la enzima inmovilizada con ONPG como sustrato.

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